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  • 2025

    1-22

    引言內耳疾病,如感音神經性耳聾和梅尼埃病等,嚴重影響患者的生活質量。基因治療作為一種新興的治療手段,在內耳疾病的治療中展現出巨大潛力。然而,內耳結構的復雜性和對損傷的高度敏感性,使得基因遞送成為一大挑戰。慢病毒載體因其高效、持久的基因表達能力,成為內耳基因治療研究的工具。小鼠耳蝸鼓室內注射是常用的內耳基因遞送方法之一,但轉染效率往往受到多種因素的影響。因此,優化小鼠耳蝸鼓室內慢病毒轉染技術,提高轉染效率和安全性,對于推動內耳基因治療的發展具有重要意義。構建慢病毒轉染內耳疾病的...

  • 2025

    1-22

    引言:SARS(嚴重急性呼吸綜合征)冠狀病毒是一種高傳染性的病原體,自2002年底爆發以來,對全球公共衛生構成了嚴重威脅。SARS-CoV的S蛋白不僅是病毒的主要結構蛋白,還在病毒與宿主細胞表面受體結合及介導膜融合進入細胞的過程中起關鍵性作用。因此,S蛋白成為SARS疫苗研究的主要靶點。裂殖酵母作為一種非常有前景的外源基因表達系統,表達的外源蛋白更接近其天然特性,是分子生物學研究中的重要工具。本研究旨在構建SARS-CoVS蛋白在裂殖酵母中的表達體系,為進一步研究新一代SAR...

  • 2025

    1-22

    引言外源基因導入哺乳動物細胞是基因功能研究、基因治療及細胞工程等領域的關鍵技術。高效、安全的基因轉移方法對于實現外源基因在細胞內的穩定表達至關重要。傳統方法如脂質體介導轉染、病毒載體轉導等雖各有優勢,但存在細胞毒性大、操作復雜或安全性隱患等問題。電穿孔法作為一種物理轉染技術,通過短暫施加高壓電場使細胞膜形成微小孔洞,允許外源DNA進入細胞,具有操作簡便、適用范圍廣及可大規模應用等優點。然而,電穿孔過程對細胞損傷較大,轉化效率與細胞存活率往往難以平衡,限制了其廣泛應用。構建高效...

  • 2025

    1-22

    摘要:本文詳細闡述了大豆矮桿導入系的外源片段剖析及基因定位研究,通過繪制圖示基因型方法分析了含有矮桿基因S的片段導入系,共檢測到100個導入片段,確定了多個與矮桿基因密切相關的位點。本研究為進一步研究大豆矮桿基因提供了重要基礎,對大豆育種具有重要意義。引言:大豆(Glycinemax)作為重要的糧油兼用作物,在全球范圍內廣泛種植。大豆種子富含蛋白質和植物油,對人類飲食和健康具有重要作用。然而,傳統大豆品種生長周期長、植株高大,給管理和收割帶來不便。因此,培育矮桿大豆品種成為大...

  • 2025

    1-21

    摘要本研究旨在探索電穿孔介導睫狀神經營養因子(CNTF)基因轉染在延緩失神經骨骼肌方面的療效。通過構建CNTF基因轉化體系,采用某品牌電穿孔儀對SD大鼠進行基因轉染,觀察其對骨骼肌的抑制作用。實驗結果表明,電穿孔介導CNTF基因轉染可顯著延緩失神經骨骼肌進程,為神經肌肉疾病的治療提供新的策略。引言神經營養因子(NTFs)作為一類具有促進和維持神經細胞生長、存活和分化的特異性蛋白質,為神經修復治療帶來了新的希望。睫狀神經營養因子(CNTF)是NTFs中的重要成員,具有廣泛的生理...

  • 2025

    1-21

    摘要:本研究旨在聯合運用陽離子多聚物PEI和方波電穿孔兩種不同機制的轉染手段,以期克服精子難轉染的問題。通過形成穩定復合物、吸附細胞表面、胞吞作用進入細胞、內涵體逃逸與DNA釋放等步驟,實現了對小鼠精子的高效核內轉染,為精子載體法在大動物中的應用提供了成功的模式。引言精子載體法是一種以精子為載體,利用精子與卵子結合的過程將外源基因帶入受精卵中形成轉基因動物的方法。該法無需專門的大型設備和技術,簡單便捷,應用廣泛,尤其對于豬、牛、羊等大動物更有方法學上的優勢,科學界一直寄厚望于...

  • 2025

    1-21

    摘要:本研究通過電穿孔技術將人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)轉染至許旺細胞,旨在提升其增殖能力和抗衰老性能,進而為神經損傷修復提供新型細胞資源。實驗結果顯示,hTERT轉染顯著增強了許旺細胞的增殖能力和端粒酶活性,優化了細胞形態。本研究為神經損傷修復策略提供了理論基礎和技術支持。引言:神經損傷疾病嚴重影響患者的生活質量,尋找有效的修復策略顯得尤為關鍵。許旺細胞(又稱雪旺細胞)作為周圍神經損傷修復中的重要細胞,具有分泌多種神經營養因子、引導軸突生長及髓鞘化的功能。然而,許旺細胞在...

  • 2025

    1-21

    摘要:本研究旨在建立一種高效的人外周血單核細胞分離及電穿孔轉染方法。通過基于HISTOPAQUE的密度梯度離心及抗體標記純化方法分離單核細胞,并使用某品牌電穿孔儀進行轉染。結果顯示,單核細胞純度高達89.95%,轉染效率為60%~70%。該方法為后續單核細胞功能研究提供了可靠的技術支持。引言人外周血單核細胞作為免疫系統的重要組成部分,在感染、炎癥及免疫反應中發揮關鍵作用。為了深入研究單核細胞的功能及其在各種疾病中的作用機制,首先需要建立高效的單核細胞分離和轉染方法。單核細胞的...

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